PurProX®AAV 정제 솔루션
PurProX의 제품 소개 및 장점®AAV 정제 솔루션
GeneMedi의PurProX® GeneMedi의 독점적인 종단간 모듈식 시스템으로, AAV 다운스트림 공정(DSP)을 위한 것입니다.
벤치탑 발견과 GMP 제조 간의 "공정 격차"를 해소하기 위해 설계된 PurProX®는 다음 철학에 따라 운영됩니다."통합 화학 및 선형 확장성"이 포트폴리오는 신속한 벤치탑 준비에서 kg 규모의 산업 생산에 이르는 도구를 포함합니다. 중요한 점은 모든 포집 제품(스핀 컬럼, 사전 충전 컬럼, 레진)이 다음 두 가지 형식으로 제공된다는 것입니다.U1 (광범위)및U2 (AAV9 및 그 변종)형식으로, 유전자 치료 개발의 모든 단계에 고순도, 고회수율, 확장 가능한 벡터 솔루션을 제공합니다.
PurProX®AAVPure Affinity Resins
Cat.No:
GMV-PurProX-AAVPure-U-1\/2
GeneMedi PurProX®AAVPure Affinity Resin은 고성능 AAV 정제를 제공합니다.
U-1: 레진은 다음과 같은 혈청형을 광범위하게 표적합니다.AAV2\/5\/6\/8\/DJ\/7m8 (다른 AAV 혈청형과 비교하여 AAV9에 대한 결합력이 약함)
U-2: 높은 친화성으로 특화되어AAV9 및 그 변종결합합니다.
PurProX®AAVPure Pre-packed Affinity Column
Cat.No:
GMV-PurProX-AAVPure-U-1\/2-P
GeneMedi's PurProX®AAVPure Pre-packed Affinity Column은 연구자들이 당사의 AAV 정제 레진을 평가하거나 소규모 AAV 벡터 정제를 수행할 수 있도록 편리하고 즉시 사용 가능한 솔루션을 제공합니다.
PurProX®AAVEasy rapid-to-purify Spin Column
Cat.No:
GMV-PurProX-AAVEasy-U-1\/2-10T
기반으로 PurProX®AAVPure 친화성 수지, AAVEasy rapid-to-purify 스핀 컬럼은 소규모 AAV 정제를 위한 신속하고 장비가 필요 없는 솔루션을 제공하며, 단 30분 만에 고순도 바이러스 벡터를 전달합니다.
PurProX®AAVFull Enrichment Kit
Cat.No:
GMV-PurProX-AAVFull-U-1
PurProX®AAVFull은 완전 캡시드 비율을 손쉽게 최대화할 수 있게 해줍니다GeneMedi의 원활한 음이온 교환(AEX) 크로마토그래피 기술을 통해.
· 편리한 주사기 형식
-일상적인 실험 도구를 사용한 신속하고 번거로움 없는 처리.
· 표적 제거
-빈 캡시드를 특별히 제거하여 프리미엄, 초고순도 AAV 벡터를 생성합니다.
· 초원심분리 불필요
-실험대 위에서 직접 최대 완전 캡시드 비율을 달성합니다.
PurProX 제품 목록®AAV 정제 솔루션: 레진, 스핀 컬럼, 사전 충전 컬럼 및 전체 캡시드 농축
| 제품 유형 | 카탈로그 번호 | 제품명 | 혈청형 | 크기 | 제품 정보 |
|---|---|---|---|---|---|
| AAV 친화 레진 | GMV-PurProX-AAVPure-U-1 | PurProX®AAVPure 친화 레진-1 | 고용량, 다중 혈청형 결합(예: AAV2/5/6/8/DJ/7m8)을 위한 다용도 레진 | 10 mL, 25 mL, 50 mL, 250 mL, 1 L, 5 L, 10 L | 세부 정보 |
| AAV 친화 레진 | GMV-PurProX-AAVPure-U-2 | PurProX®AAVPure 친화 레진-2 | AAV9 및 AAV-PHP 시리즈와 같은 변종에 최적화 | 10 mL, 25 mL, 50 mL, 250 mL, 1 L, 5 L, 10 L | 세부 정보 |
| 사전 충전 컬럼 | GMV-PurProX-AAVPure-U-1-P | PurProX®AAVPure 프리패킹 컬럼-1 | 고용량, 다중 혈청형 결합을 위한 다용도 레진 (예: AAV2/5/6/8/DJ/7m8) | 1mL,5mL | 세부정보 |
| 프리패킹 컬럼 | GMV-PurProX-AAVPure-U-2-P | PurProX®AAVPure 프리패킹 컬럼-2 | AAV9 및 AAV-PHP 시리즈와 같은 변종에 최적화됨 | 1mL,5mL | 세부정보 |
| 스핀 컬럼 (10회 검사) | GMV-PurProX-AAVEasy-U-1-10T | PurProX®AAVEasy 스핀 컬럼-1 | 고용량, 다중 혈청형 결합을 위한 다용도 레진 (예: AAV2/5/6/8/DJ/7m8) | 10T | 세부정보 |
| 스핀 컬럼 (10회 검사) | GMV-PurProX-AAVEasy-U-2-10T | PurProX®AAVEasy Spin Column-2 | AAV9 및 AAV-PHP 시리즈와 같은 변이체에 최적화됨 | 10T | 세부 정보 |
AAV 정제 플랫폼을 사용한 검증 데이터
- PurProX®AAVPure Affinity Resin
- PurProX®AAVPure Pre-packed Column
- PurProX®AAVEasy Spin Columns
- PurProX®AAVFull Enrichment Filters
PurProX®AAVPure Affinity Resin
PurProX®AAVPure Affinity Resin-1 (AAV 혈청형 2, 5, 6, 8, DJ 및 7m8 정제용)
PurProX® AAVPure Affinity Resin-1 (GMV-PurProX-AAVPure-U-1)로 정제된 AAV의 은 염색. 대조군으로 T사의 레진을 사용.
PurProX®AAV9 정제용 AAVPure Affinity Resin-2
PurProX® AAVPure Affinity Resin-2 (GMV-PurProX-AAVPure-U-2)로 정제된 AAV9의 은 염색. 대조군으로 T사의 레진을 사용.
PurProX®AAVPure 사전 충전 컬럼
그림 1. AKTA에서 AAV 친화 레진으로 정제된 AAV8
ÄKTA 시스템에서 AAV 친화 레진을 사용한 AAV8 혈청형의 정제 과정을 보여주는 크로마토그램. x축은 시간, y축은 흡광도(단백질 A280, 핵산 A260)와 전도도를 나타냅니다. 피크는 시료 로딩, 세척, 용출 단계를 나타냅니다.
그림 2. AAV8 정제의 은 염색
SDS-PAGE 젤의 은 염색으로 AAV8 정제 분획의 단백질 밴드를 나타냅니다. 레인에는 분자량 마커, 용해액, 유출액(FT), 용출 분획이 포함됩니다. 캡시드 단백질(VP1, VP2, VP3)이 용출 레인에서 약 60-80 kDa에 보입니다.
그림 3. AAV6 정제의 은 염색
SDS-PAGE 젤의 은 염색으로 AAV6 정제 분획의 단백질 밴드를 나타냅니다. 레인에는 마커, 용해액, 유출액(FT), 용출 분획이 있으며, AAV6 캡시드 단백질(VP1, VP2, VP3)이 용출 레인에서 두드러집니다.
표 1. 정제된 AAV의 여러 혈청형 회수율
| 혈청형 | 시료 | Vg | 회수율 (%) |
|---|---|---|---|
| AAV2 | 로드 | 5.72E+12 | / |
| 용출 | 5.19E+12 | 90.73 | |
| AAV5 | 로드 | 3.36E+13 | / |
| 용출 | 3.13E+13 | 93.15 | |
| AAV6 | 로드 | 8.28E+12 | / |
| 용출 | 7.73E+12 | 93.36 | |
| AAV8 | 로드 | 1.33E+13 | / |
| 용출 | 1.24E+13 | 93.67 |
PurProX®AAVEasy 스핀 컬럼
그림1. PurProX에 의한 AAV5 정제®AAVEasy
처리 시간: 29분
회수율: 95.43%
PurProX®AAV 혈청형 2, 5, 6, 8, DJ 및 7m8 정제용 AAVEasy 스핀 컬럼-1
PurProX® AAVEasy 스핀 컬럼-1(GMV-PurProX-AAVEasy-U-1)로 정제된 AAV의 은 염색
PurProX®AAV9 정제용으로 설계된 AAVEasy 스핀 컬럼-2
PurProX® AAVEasy 스핀 컬럼-2(GMV-PurProX-AAVEasy-U-2)로 정제된 AAV의 은 염색. 대조군으로 T사의 수지(AKTA 정제)가 사용되었습니다.
PurProX®AAV 전체 농축 필터
AAV8 크로마토그램은 이 농축 키트가 빈 캡시드와 충전된 캡시드를 효율적으로 분리하여 높은 충전 캡시드 비율의 고순도 AAV 벡터를 최종 수율로 제공함을 보여줍니다.
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