PurProX®AAVPure 사전 충전 컬럼 — 공정 개발의 기초
PurProX®사전 충전 컬럼(0.5mL/1mL/5mL)은 연구개발과 스케일업 간의 중요한 연결고리 역할을 합니다.
정확히 동일한 것으로 사전 충전AAVPure 친화성 미디어대량 생산에 사용되며, 이 컬럼은 다음 두 가지 버전으로 제공됩니다:U1및U2버전입니다. "플러그 앤 플레이" 설계를 통해 연구자는 번거로운 충전 절차를 생략하고 FPLC 시스템(예: ÄKTA)에 직접 연결하여 혈청형 특이적 파라미터 스크리닝 및 소규모 벡터 생산을 수행할 수 있습니다.
PurProX®AAV 정제 솔루션
COAPurProX 주문®사전 충전 컬럼
| 제품 유형 | 카탈로그 번호 | 제품명 | 크기 | 가격 (KRW) |
|---|---|---|---|---|
| 사전 충전 컬럼 | GMV-PurProX-AAVPure-U-1-P1ml | PurProX®AAVPure 사전 충전 컬럼-1 | 1mL | |
| 사전 충전 컬럼 | GMV-PurProX-AAVPure-U-2-P1ml | PurProX®AAVPure 사전 충전 컬럼-2 | 1mL | |
| 사전 충전 컬럼 | GMV-PurProX-AAVPure-U-1-P5ml | PurProX®AAVPure 사전 충전 컬럼-1 | 5mL | |
| 사전 충전 컬럼 | GMV-PurProX-AAVPure-U-2-P5ml | PurProX®AAVPure 사전 충전 컬럼-2 | 5mL |
PurProX 관련 제품®사전 충전 컬럼
| 제품 유형 | 카탈로그 번호 | 제품명 | 크기 | 가격 (KRW) |
|---|---|---|---|---|
| AAV 친화 레진 | GMV-PurProX-AAVPure-U-1-10ml | PurProX®AAVPure 친화 레진-1 | 10mL | |
| AAV 친화 레진 | GMV-PurProX-AAVPure-U-1-25ml | PurProX®AAVPure 친화 레진-1 | 25mL | |
| AAV 친화성 수지 | GMV-PurProX-AAVPure-U-1-50ml | PurProX®AAVPure 친화성 수지-1 | 50mL | |
| AAV 친화성 수지 | GMV-PurProX-AAVPure-U-1-250ml | PurProX®AAVPure 친화성 수지-1 | 250mL | |
| AAV 친화성 수지 | GMV-PurProX-AAVPure-U-1-1L | PurProX®AAVPure 친화성 수지-1 | 1L | |
| AAV 친화성 수지 | GMV-PurProX-AAVPure-U-1-5L | PurProX®AAVPure Affinity Resin-1 | 5L | |
| AAV Affinity Resin | GMV-PurProX-AAVPure-U-2-10ml | PurProX®AAVPure Affinity Resin-2 | 10mL | |
| AAV Affinity Resin | GMV-PurProX-AAVPure-U-2-25ml | PurProX®AAVPure Affinity Resin-2 | 25mL | |
| AAV Affinity Resin | GMV-PurProX-AAVPure-U-2-50ml | PurProX®AAVPure Affinity Resin-2 | 50mL | |
| AAV 친화성 레진 | GMV-PurProX-AAVPure-U-2-250ml | PurProX®AAVPure 친화성 레진-2 | 250mL | |
| AAV 친화성 레진 | GMV-PurProX-AAVPure-U-2-1L | PurProX®AAVPure 친화성 레진-2 | 1L | |
| AAV 친화성 레진 | GMV-PurProX-AAVPure-U-2-5L | PurProX®AAVPure 친화성 레진-2 | 5L |
기술 사양
| 카탈로그 번호 | GMV-PurProX-AAVPure-U-1-P;GMV-PurProX-AAVPure-U-2-P |
| 제품명 | PurProX®AAVPure 사전 충전 컬럼 |
| 지지 매트릭스 | 폴리머 레진 |
| 고정화 리간드 | VHH |
| 혈청형 친화도 | GMV-PurProX-AAVPure-U-1-P: 테스트된 결합- AAV2, AAV5, AAV6, AAV8, AAV7m8, AAV-DJ; GMV-PurProX-AAVPure-U-2-P: 테스트된 결합- AAV9 |
| 결합 용량 | ~3E+14 vp/mL 레진 |
| 배송 용매 | 2% 벤질 알코올 |
| 평균 입자 크기 | 50 µm |
| 권장 유속 | ≥3분 체류 시간 |
| 기계적 저항성 | 10bar (1Mpa) |
| pH 범위 (모든 리간드) | 2-10 |
| 작동 온도 | RT |
| 보관 지침 | 얼리지 마십시오 |
PurProX 검증 데이터®다양한 AAV 혈청형을 위한 AAVPure 사전 충전 컬럼
그림1. AKTA에서 AAV 친화 수지로 정제된 AAV8
ÄKTA 시스템에서 AAV 친화 수지를 사용한 AAV8 혈청형의 정제 과정을 보여주는 크로마토그램. x축은 시간을, y축은 흡광도(A280은 단백질, A260은 핵산)와 전도도를 나타냅니다. 피크는 시료 로딩, 세척 및 용출 단계를 나타냅니다.
그림2. AAV8 정제의 은 염색
은 염색된 SDS-PAGE 겔로 AAV8 정제 분획의 단백질 밴드를 보여줍니다. 레인에는 분자량 마커, 용해물, 통과액(FT) 및 용출 분획이 포함됩니다. 캡시드 단백질(VP1, VP2, VP3)이 ~60-80 kDa에서 용출 레인에 보입니다.
그림3. AAV6 정제의 은 염색
은 염색된 SDS-PAGE 겔로 AAV6 정제 분획의 단백질 밴드를 묘사합니다. 레인은 마커, 용해물, 통과액(FT) 및 용출을 보여주며, AAV6 캡시드 단백질(VP1, VP2, VP3)이 용출 레인에서 두드러집니다.
표1. 정제된 AAV의 여러 혈청형 회수율
| 혈청형 | 시료 | Vg | 회수율 (%) |
|---|---|---|---|
| AAV2 | 로드 | 5.72E+12 | / |
| 용출 | 5.19E+12 | 90.73 | |
| AAV5 | 로드 | 3.36E+13 | / |
| 용출 | 3.13E+13 | 93.15 | |
| AAV6 | 로드 | 8.28E+12 | / |
| 용출 | 7.73E+12 | 93.36 | |
| AAV8 | 로드 | 1.33E+13 | / |
| 용출 | 1.24E+13 | 93.67 |
자주 묻는 질문 (FAQ)
Q1: PurProX® AAVPure Pre-packed Column이란 무엇인가요?
답변: PurProX® AAVPure Pre-packed Column은 고성능 AAV 정제 수지(AAVPure-U-1 또는 U-2)가 미리 충전된 즉시 사용 가능한 친화 크로마토그래피 컬럼으로, 수동 패킹 없이 소규모 AAV 벡터 정제 또는 공정 매개변수 스크리닝을 위해 설계되었습니다.
Q2: 어떤 변종이 제공되며, 어떤 AAV 혈청형을 표적으로 합니까?
A: 두 가지 변형이 있습니다:
-U-1: 광범위 스펙트럼으로 AAV2/5/6/8/DJ/7m8에 효과적;
-U-2: AAV9 및 그 변종(예: AAV-PHP 시리즈)에 특별히 최적화됨.
Q4: 수지 화학은 벌크 AAVPure 친화성 수지와 동일한가요?
A: 예. 사전 충전 컬럼은 벌크 AAVPure 수지와 정확히 동일한 친화성 매질을 사용하여 공정 동질성을 보장하고 연구개발에서 생산까지 선형적 스케일업을 가능하게 합니다.
Q8: 컬럼은 재사용 가능한가요?
A: 적절한 재생 프로토콜을 통해 제한적으로 재사용이 가능하지만, 소규모 응용에서 일관된 결과를 위해 일회용 사용이 권장됩니다. 재생 지침은 기술 지원팀에 문의하십시오.
Q9: AAVEasy Spin Column과 어떻게 다른가요?
A: AAVPure 사전 충전 컬럼은 정밀한 유량 및 버퍼 제어를 위해 FPLC 시스템이 필요하며 공정 개발에 이상적입니다. 반면 AAVEasy는 원심분리 기반의 장비 없이 빠른 <30-minute 정제를 위한 도구입니다. 둘 다 동일한 수지 화학을 공유하지만 다른 워크플로우 요구를 충족합니다.